呼吸道病原体RNA检测
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呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统,分为上呼吸道感染和下呼吸道感染,一般表现为发病急,有发热、乏力、头痛及全身酸痛等明显的全身中毒症状和咳嗽、流涕等呼吸道症状,严重时主要表现为发热、盗汗、全身不适及咳嗽、咳痰、咯血、胸痛、呼吸困难等。常见的病原体为病毒,少数为细菌。明确感染的病原体,选择合适的治疗方案,可以有效地防止抗生素滥用,使患者得到及时有效的治疗。

我方产品可用于体外定性检测人咽拭子样本中甲型流感病毒的H1N1/H3N2型、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、人副流感病毒的1/2/3型、腺病毒的B/E属、肺炎支原体、肺炎衣原体的核酸。



呼吸道病原体RNA检测内容

流感病毒是一种有包膜、分节段基因组的单链RNA病毒,属于正粘病毒科,根据核蛋白和包膜内侧面的M1蛋白的抗原性将流感病毒分为甲、乙、丙三型。甲型流感病毒在根据包膜表面血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)两种刺突的抗原性分为若干亚型,目前包括H1-H6亚型和N1-N9亚型,H1N1、H3N2和乙型流感病毒为较常见的季节性流感病毒,流感病毒的感染是季节性的,而且每年都会发生甲型或乙型流感病毒流行病,特别是北半球的11月-4月容易爆发。

呼吸道合胞病毒是单链RNA包膜病毒,含有两个亚型(A/B),广泛分布与世界各地,是引起婴幼儿下呼吸道感染主要的和常见的病原体,在绝大部分地区所引发1岁以内婴幼儿肺炎和支气管炎远远高于其他病原微生物,成年人感染往往导致普通感冒,具有流传季节性,易于在冬天和早春感染。

副流感病毒是单链RNA包膜病毒,1型和2型的最典型的临床特征是造成儿童喉气管支气管炎,3型常常导致肺炎和细支气管炎,4型通常被认为散发存在,引起的呼吸道症状较为轻微。

腺病毒是一种双链DNA病毒,共有52种血清型,感染后的典型症状是咳嗽、鼻塞和咽炎,同时伴有发热、寒战、头痛和肌肉痛等。腺病毒引起的呼吸道、泌尿道以及胃肠道在临床表现方面是与其他病原微生物的感染非常相似,因此仅根据临床表现来进行疾病的诊断是比较困难的,需要进行实验室诊断加以证实。

肺炎支原体是造成人类支原体肺炎的病原体,支原体肺炎的病理改变以间质性肺炎为主,有时并发支气管肺炎,成为原发性非典型肺炎。主要经飞沫方式传染,潜伏期2-3周,发病率以青少年最高,肺炎支原体是介于细菌与病毒之间的一种胸膜肺炎微生物,是儿童和成人社区获得性肺炎的常见病原体。

肺炎衣原体是一种专性细胞内寄生病原体,是人类呼吸道疾病的重要病原体,可引起急慢性呼吸道疾病,社区获得性肺炎、支气管炎和鼻窦炎5%-10%是由肺炎衣原体引起。其引起的呼吸道感染临床表现不典型,通常以咽痛和音哑起病,数日至7天后出现咳嗽,与其他呼吸道疾病相比,自起病至就医的时间以肺炎衣原体感染为最长。


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详细信息
呼吸道病原体RNA检测原理

7联呼吸道病原体核酸检测试剂盒产品采用双扩增技术(即T7核酸扩增和生物素信号放大技术)检测咽拭子采集的细胞中的七种呼吸道病原体RNA。样本中的细胞经细胞裂解液裂解后,释放病原体核酸,然后再逆转录酶和T7RNA聚合酶的作用下,经过逆转录和转录过程,实现病原体的T7核酸扩增。扩增后的RNA产物加入到包被有捕获探针的微孔中进行杂交,同时加入该捕获探针对应的特异探针,微孔中的捕获探针可与RNA产物结合使其锚定到微孔中,特异探针的一端可结合到RNA产物上,另一端与下一步加入的放大探针结合,实现信号放大过程,标记有多生物素的放大探针随后与酶联物结合,最终形成捕获探针-RNA扩增产物-特异探针-放大探针-酶联物复合体,最终加入化学发光底物,在化学发光仪上进行检测。

呼吸道病原体RNA检测样本要求

1)适用样本类型:咽拭子

2)样本采集:咽拭子迅速地擦拭待测者两侧腭弓、咽及扁桃体,取毕后将咽拭子插入装有PBS缓冲液或生理盐水的采集管中,折断并弃去咽拭子尾部旋紧管盖。注明标本留取时间及时送检,未处理样本可以在4℃存放24小时。

3)样本保存和运送:建议待测样本立即进行检验,若需要保存后检验,待测样本需经过预处理得到细胞沉淀后保存于-20℃或-80℃,在-20℃保存不超过三个月,-80℃保存不超过十五个月,样本运送采用冰壶或加冰泡沫箱。

注:不合理的样本采集、转运及处理、样本中病毒的滴度过低均有可能导致假阴性结果。

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呼吸道病原体RNA检测项目优势

1)检测RNA:早期诊断,同时反应病原体在体内活跃繁殖状况,更有临床相关性;

2)高通量:样本制作简单,无需核算提纯,实验操作配套全自动仪器可同时加载72次测试;

3)特异性强:多对特异性引物扩增,特异性探针多位点杂交,双重保证特异性,七种病原体间以及与其他病毒、细菌之间无交叉反应;

4)灵敏度高:七项指标中每个单项检测灵敏度与PCR相近,最低检测限1.4-500TCID50/mL;

5)多联检:1次检测覆盖常见呼吸道病原体,提供全面的病原学诊断信息。